內酰胺酶檢測：兩種方法教您正確進(jìn)行檢測
更新時(shí)間：2023-04-19 文章更新于2023-04-19 點(diǎn)擊次數：2593次
內酰胺酶檢測的檢測速度快，所以檢測β-內酰胺酶與常規藥敏實(shí)驗相比，能更快地獲得結果。為了保證內酰胺酶檢測的準確性，操作人員需要按照正確的方法來(lái)進(jìn)行檢測，下面我們就來(lái)介紹一下常用的兩種方法。
1.紙片擴散法
(1）初篩試驗∶選用頭孢泊肟、頭孢他啶、氦曲南、頭孢噻肟或頭孢曲松(每片含量均為30ug)藥敏紙片中的至少2種，用苗勒-欣頓(MHA)瓊脂，標準紙片擴散法測試抑菌環(huán)直徑，按美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì )(NCC LS)1997年標準進(jìn)行判斷。凡頭孢泊肟或頭孢他啶的抑菌環(huán)直徑≤22mm，頭孢曲松s25mm，氨曲南或頭孢噻肟≤27mm，均應高度懷疑為ESBLs菌株，應進(jìn)一步作確認試驗來(lái)加以確診。
(2）表型確證試驗∶用頭孢他啶(每片30ug)和頭孢他啶加克拉維酸(30ug和10ug);頭孢噻骯(每片30ug)和頭孢噻肟加克拉維酸(30ug和10ug);分別測量2種紙片單獨及加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑。加克拉維酸和不加克拉維酸的抑菌環(huán)直徑≥5mm可確認為ESBLs菌株。
?、?微量肉湯稀釋法
(1）初篩試驗︰原理同ESBLs紙片擴散法步驟∶將大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相應濁度的菌懸液，加入含有以下濃度藥物的微量反應板中，頭孢泊肟、頭孢他啶、氦曲南、頭孢噻腸、頭孢曲松。然后將接種了待測菌的反應板置于35℃環(huán)境下，孵育16~18小時(shí)后觀(guān)察細菌在不同藥物中的生長(cháng)現象。
(2）表型確證試驗∶按照藥敏試驗的微量肉湯稀釋法，將大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌配成相應濁度的菌懸液，加入含有以下梯度濃度藥物的微量反應板中，頭孢他啶的濃度范圍為0.25~128ug/ml，頭孢他啶/克拉維酸為0.25/4~128/4ug/ml，頭孢噻肟為0.25~64ug/d，頭孢噻污/克拉維酸為0.25/4~64/41ug/ml。置于35℃環(huán)境下，孵育16~18小時(shí)后觀(guān)察在不同濃度藥物中的生長(cháng)現象。
以上就是內酰胺酶檢測常用的兩種方法，希望能幫助大家更好地進(jìn)行檢測并保證其檢測的準確性。
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